（文章发表于MORPHOLOGIE杂志，年。作者T.Delabarde等，单位系UniversitédeParis,CNRSFRE,institutmédico-légal）
摘要：通过对高腐或白骨化尸体的骨折样本进行显微CT（microCT）及组织病理检查两种方式处理，对比于尸体解剖中肉眼观察到的骨折情况，对骨折形成时间进行分析（生前或死后，以及生前骨折伤后时间的分析），从而评价显微CT及病理检查效果。
结论：1需要将大体解剖观察到的骨折情况与显微CT结果结合后综合判断，以避免判断失误；2显微CT可以识别早期骨愈合的征象，但是对应标本的组织病理检查仍表明该骨折是死前不久产生的（由于观察到了出血以及未见明显骨愈合表现），这体现了显微CT的优势；3显微拉曼光谱技术（Ramanmicrospectroscopy）可以明确骨折线中的血凝块存在（从而证实该骨折系生前）
一、尸体情况
1号尸体：50岁男性高腐尸体。该死者死于家中，有酗酒史，二个月前曾经历摩托车事故，拒绝治疗。尸检发现左顶骨骨折，无头皮损伤及帽状腱膜出血表现。大体观察该骨折无明显愈合。取骨折处部分颅骨备检。
2号尸体：深林野外发现一白骨化尸体。经检验，死者系19岁、男性。死者颅面骨表现为：双侧下颌骨骨折，鼻骨可疑骨折。取下颌骨及鼻骨备检。
3号尸体：铁路旁灌木丛发现一白骨化成年尸体。大体检验发现死者颅骨有三处骨折：额骨一处（无愈合征象），右额顶骨一处，沿人字缝延伸至外耳道一处（该处骨折有愈合征象）。该尸体肋骨也发现骨折。
二、分析方法
1显微CT分析
设备为Sky显微X线摄影机（BrukerTMmicroCT,Kontich,Belgium）。样本干燥后用铜及橡胶包埋。机器参数设置为70Kv，μA，采用0.5mm铝过滤器。并进行2D及3D重建（详略）
2组织病理检查
样本干燥处理后，放入70%酒精固定一周，丙酮脱水后直接用聚甲基丙烯酸甲酯包埋（不用脱钙处理）。后续切片观察。
3显微拉曼光谱技术（详略）
三结果（以案例1-3的顺序论述）
图1尸检中发现的左顶骨骨折（案例1）
图2立体显微镜显示的左顶骨骨折（案例1）
图3显微CT的左顶骨骨折边缘表现（案件1）。（A，C）矢状切面，（B，D）冠状切面。红色箭头显示新生的编织骨，呈致密纤维结构状，含不成熟的骨细胞
图4A，B图显示用戈德纳三色染色法（Goldnertrichrome）处理未脱钙的骨组织。红箭头显示纤维组织，蓝箭头显示编织骨（处于骨折边缘处，案例1）。C图系用天狼星红染色（picroSirius），在偏振显微镜（polarizationmicroscopy）下显示骨折边缘的编织骨（蓝色箭头）。D图系用甲苯胺蓝染色，在偏振显微镜下显示骨折边缘的致密区，区内富含粘多糖（红箭头）和编织骨（蓝箭头）。
小结一下案例1，图1及图2显示案例1骨折无明显愈合，边缘锯齿状、锐利。然而，显微CT清楚显示了新生编织骨存在，组织病理检查也表明了纤维增生等愈合征象。大体观评价该骨折系死前不久的骨折，而显微表现示其至少有天。由于该死者两个月前经历了交通事故，现在我们的结论是：不能确定是否该交通事故引起了骨折表现（有可能在交通事故之前产生）。
图5案例2死者左鼻骨显示编织骨（FX01）
图6（A图）下颌骨左内侧面显示编织骨（红箭头）和骨折间隙（绿箭头）（FX02，案例2）。（B图）下颌骨右内侧面显示编织骨（红箭头）和骨折间隙（绿箭头）。
图7（A-F）显微CT处理案例2的下颌骨支显示编织骨（绿箭头），血管通道（红箭头）和牙根管（黄箭头）（FX02案例2）
图8（A-D）显微CT处理鼻骨显示：编织骨（绿箭头）和血管通道（红箭头）（FX01案例2）
图9（A）戈德纳三色染色法处理案例2的鼻骨，显示编织骨与板层骨的界限（FX01，案例2）。（B）通过偏振显微镜显示与A同一区域。
小结一下案例2，大体上案例2鼻骨及下颌骨骨折周围见编织骨形成，下颌骨仍存在骨折间隙。这种存在编织骨同时骨桥尚未形成的表现表明该骨折属于愈合早期。显微CT证实了上述表现，但同时显示了血管通道形成（图7和图8）。组织病理检查显示完整的骨单位，表明骨修复处于亚急性期（图9）。由于完整的骨单位（哈弗斯系统）形成以及出现多个同心圆结构，该损伤修复至少有天（即成骨细胞重建一个新的骨单元需要的时间）。
图10颅骨上面观，显示额骨的骨折线（红箭头）（FX01，案例3）译者注：原文的确写的是额骨（frontalbone）
图11立体显微镜显示的额骨骨折线（FX01，案例3）
图12显微CT显示额骨骨折无明显愈合（FX01，案例3）
图13甲苯胺蓝染色显示骨折无明显愈合表现（FX01，案例3）
图14骨折边缘可以看见血凝块（黄箭头）。反射照明显示。（译者注：可能是用偏光显微镜显示出的效果）
图15显微拉曼光谱技术。（A）显示远离骨折的正常颅骨结构光谱。（B）显示骨折区血凝块的典型光谱结构。
图16颅骨右侧面显示额顶部骨折愈合征象（红色箭头）（FX02，案例3）
图17人字缝左侧显示愈合的骨折线（红色箭头）（FX03，案件3）
图18（A）显微CT表现（B）病理显示骨折边缘出现愈合征象（FX02，案例3）
图19（A）显微CT表现（B）骨折线显示愈合征象，部分骨皮质已经重建、连续。（FX03，案件3）
小结一下案例3。图10显示该案例额骨骨折大体观察有不规则的边缘，没有愈合表现。这种大体表现（无愈合征象，骨折边缘不规则）表明是死前不久的骨折（图11）。显微CT显示一条清晰的骨折线从骨髓腔及哈弗斯管中间穿过，不伴有任何骨修复表现（图12）。组织病理检查也证实了无修复表现（图13），但是同时也提示了重要的一点：在骨折边缘存在血凝块（图14）。该骨折样本中通过拉曼光谱分析得出的光谱图像中，存在血红蛋白与纤维蛋白的图谱片段，而上述片段是既往文献中认定出血的重要标志物。因此综合上述分析，该骨折被认为是死前不久的骨折，与死亡原因相关性大。
案例三中其他两处骨折：大体观显示骨边缘圆滑，有明显愈合表现，因此从大体观察认定，该骨折为生前一段时间骨折（图16与图17）。显微CT与病理检查证实了存在骨修复情况（图18与图19）。在案例3中，分别通过骨折的大体观与显微表现得出的结论是一致的。
四讨论
（讨论第一部分作者复习及列举了历史文献，讲述从生前骨折与死后骨折形态学鉴别，发展到组织病理检查及显微CT的过程）
讨论第二部分：本文中有两个骨折样本通过大体表现被认定为死前不久的骨折（案例1，案例3的额骨），但是案例1病理检查显示骨存在修复过程，伤后时间至少有天。案例3的额骨虽然大体观确认了是死前不久的骨折，但是病理检查和拉曼光谱分析确认了血凝块的存在，该血凝块对诊断死前不久的骨折提供了更有力的支持。
尽管最近有作者称病理检查是诊断骨愈合程度的最好方法，但是，显微CT能更好识别早期愈合征象。此外，有文献报道了勒死及枪弹伤案例中用显微CT确认骨折情况。
尽管需要更多研究支持，但我们认为对于仅凭大体观判断伤后时间是要十分小心的，尤其是那些缺乏愈合征象，骨折边缘锐利、不整齐的案子。此外，诸如案例2中骨折，大体看起来是早期愈合的骨折，显微表现却存在天。因此，对于要诊断死前不久（与死亡密切相关）的骨折，需要将大体表现与显微表现相结合判断，得出最终结果。
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